無血清細胞凍存液原位凍存方式：從培養(yǎng)狀態(tài)良好的細胞培養(yǎng)板中將培養(yǎng)基上清吸取干凈，再加入適量細胞凍存液于培養(yǎng)孔板中，充分浸潤細胞，蓋上蓋板，做好密封措施，防止染菌，然后直接將含凍存液的細胞培養(yǎng)板放入-80℃冰箱，冷凍保存。
 

　　無血清細胞凍存液原位復蘇方式：從冰箱取出凍存培養(yǎng)板，立即放入37℃水浴槽中快速解凍。待凍存的細胞懸液*融化后，輕輕吸去細胞凍存液，按照常規(guī)換液操作加入新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)進行培養(yǎng)。
 

　　凍存管凍存方式：按照常用方法收集懸浮細胞或貼壁細胞于試管中，按照培養(yǎng)細胞密度和所用細胞凍存管的尺寸計算所需凍存細胞數(shù)。取相當于所需細胞數(shù)的細胞懸浮液量，置于離心管中，離心收集培養(yǎng)細胞。移去離心管中的上清液，再加入適量細胞凍存液于離心管中，緩慢混合均勻，制成細胞混合液。將離心管中的細胞混合液分裝于已標示的冷凍保存管中，直接將含細胞懸液的凍存管放入-80℃冰箱，冷凍保存。
 

　　無血清細胞凍存液注意事項：細胞凍存液在凍存細胞分裝后，應(yīng)減少在外存放時間，盡快移入-80℃超低溫冰箱。選擇凍存處于對數(shù)生長期的細胞有助于提高復蘇細胞存活率。對于干細胞(ES細胞)，原代細胞等凍存時，應(yīng)該事先將所凍存的細胞進行至少為期一周的干產(chǎn)品試驗性細胞凍存培養(yǎng)，確認性能后在進行正式凍存。