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抗熒光衰減封片劑的作用和使用方法介紹

更新時(shí)間:2021-10-13   點(diǎn)擊次數(shù):1474次
  抗熒光衰減封片劑是在進(jìn)行熒光顯微鏡觀察時(shí),用于對(duì)熒光組織和細(xì)胞樣品的封片。封片劑以高純度甘油為介質(zhì),內(nèi)含抗熒光淬滅劑,有強(qiáng)烈的抗熒光衰減作用。樣品最大限度延長(zhǎng)熒光持續(xù)時(shí)間和維持熒光發(fā)光強(qiáng)度,同時(shí)封片劑中的其它成分有助于保持組織抗原抗體處于結(jié)合狀態(tài),適用于所有光譜范圍的熒光,能用于各種組織、細(xì)胞免疫熒光染色的自發(fā)熒光消除,特別適用神經(jīng)組織自發(fā)熒光淬滅。
 
  許多組織會(huì)產(chǎn)生可透過(guò)各種波長(zhǎng)濾光片的內(nèi)源性自發(fā)熒光,顯著干擾抗體標(biāo)記熒光觀察甚至導(dǎo)致熒光組化染色失敗。抗熒光衰減封片劑中的離子可用碰撞方式捕獲自發(fā)熒光光源分子發(fā)出的電子,阻止該電子從激發(fā)態(tài)回歸基態(tài)并阻止能量釋放,從而淬滅自發(fā)熒光。采用優(yōu)化的孵育時(shí)間,可以最大限度地消除自發(fā)熒光而不明顯影響抗體標(biāo)記的熒光。封片溶液成分無(wú)特殊毒性。如蓋玻片脫落或錯(cuò)位,可將玻片放入PBS中取出蓋玻片,重新用封片劑封片。也可將適量封片劑直接加到細(xì)胞培養(yǎng)孔內(nèi),進(jìn)行熒光觀察。
 
  抗熒光衰減封片劑使用方法:
 
  1.吸去載玻片上的液體,略微晾干殘留液體。
 
  2.取封片劑滴加在載玻片樣品處,也可直接加到細(xì)胞培養(yǎng)孔內(nèi)觀察。
 
  3.蓋上蓋玻片,輕輕壓蓋玻片,用濾紙小心吸除蓋玻片周?chē)嘤嘁后w,室溫放置數(shù)分鐘。
 
  4.直接進(jìn)行熒光顯微鏡觀察。

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