蘇木素染色液的染色原理,快來看一看吧!
更新時間:2022-09-17 點擊次數(shù):6913次
1、核染色原理:蘇木精是一種堿性天然染料,可以染色細胞核。細胞核中的染色質(zhì)主要由DNA組成。在DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)中,兩條核苷酸鏈上的磷酸基團向外,使DNA雙螺旋的外側(cè)帶負電并呈酸性。通過與帶有離子鍵或氫鍵的帶正電的蘇木精堿性染料結(jié)合,容易染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍色,因此細胞核被染成藍色。
2、細胞質(zhì)染色原理:曙紅是一種化學(xué)合成的酸性染料,可以在一定條件下對細胞質(zhì)進行染色。細胞質(zhì)的主要成分是蛋白質(zhì),它是一種兩性化合物。細胞質(zhì)的染色與染料溶液的pH值密切相關(guān)。當(dāng)染色溶液的pH值低于細胞質(zhì)蛋白的等電點(4.7~5.0)時,細胞質(zhì)蛋白以堿性形式電離,細胞質(zhì)帶正電荷,可以用帶負電荷的酸性染料染色。
3、分化:染色后,使用一些特定溶液去除組織中過量的染色劑。這個過程稱為微分,使用的溶液稱為微分溶液。在HE染色中,通常使用1%鹽酸乙醇作為分化溶液。因為酸可以破壞蘇木精的醌結(jié)構(gòu),它可以將組織與色素分離并褪色。
4、藍色回復(fù):分化后,蘇木精在酸性條件下呈紅色離子狀態(tài),呈紅色;在堿性條件下,它處于藍色離子狀態(tài),是藍色的。用酸性乙醇將組織切片分化成紅色或粉紅色后,立即用水去除組織切片上的酸并停止分化。然后用弱堿性水使蘇木精染色的細胞核呈藍色。這個過程稱為發(fā)藍或發(fā)藍。此外,它還可以使細胞核在不浸泡的情況下變藍,但需要很長時間。